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　　天津檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)產(chǎn)品安全技術(shù)中心主持的國家質(zhì)檢總局科研項(xiàng)目“一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生項(xiàng)目快速檢測技術(shù)的研究”通過專家組驗(yàn)收，該項(xiàng)目針對當(dāng)前一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品前處理過程冗長、操作不方便的現(xiàn)狀，采用多重?zé)晒釶CR技術(shù)，解決了以往檢測時(shí)間長、通關(guān)速率低等問題，為該類型產(chǎn)品大批量檢測提供了技術(shù)支持。

　　傳統(tǒng)方法亟須改進(jìn)

　　一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品是與使用者皮膚直接接觸產(chǎn)品，其衛(wèi)生安全性能尤其重要，如果生產(chǎn)工廠在原料控制、環(huán)境消毒、清潔制度、生產(chǎn)過程等方面管理不善，都可能孳生對人身體有害的微生物。

　　對進(jìn)出口一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品進(jìn)行微生物項(xiàng)目檢測是國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)最重要的安全衛(wèi)生項(xiàng)目要求，我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品要進(jìn)行微生物檢測，包括初始污染菌、細(xì)菌菌落總數(shù)、大腸菌群致病性化膿菌、真菌菌落總數(shù)的檢測，國外大多數(shù)國家標(biāo)準(zhǔn)對一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生也有類似的要求。

　　目前國內(nèi)外進(jìn)行一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品微生物檢測一般采用細(xì)菌培養(yǎng)方法。其優(yōu)點(diǎn)是方法可靠成熟，但目的微生物都需要分別進(jìn)行培養(yǎng)及檢測，每次檢測需要至少7天時(shí)間才能完成，導(dǎo)致檢測時(shí)間長，遠(yuǎn)不能適應(yīng)進(jìn)出口檢驗(yàn)工作需要。

　　近年來，我國各口岸進(jìn)口一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品數(shù)量呈增長趨勢。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2012年天津口岸全年進(jìn)口357批，貨值1500萬美元，2013年上半年進(jìn)口達(dá)214批，貨值1200萬美元。進(jìn)口量的不斷增加給檢驗(yàn)檢疫部門提出了更高的要求。

　　為進(jìn)一步提高針對一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品的檢驗(yàn)監(jiān)管水平，保證產(chǎn)品質(zhì)量，保障消費(fèi)者身體健康安全，天津檢驗(yàn)檢疫局落實(shí)“檢得快、檢得出、檢得準(zhǔn)”要求，在現(xiàn)在檢測方法的基礎(chǔ)上開展科研攻關(guān)，旨在建立一套快速高效、高通量的檢測方法，為檢驗(yàn)檢疫執(zhí)法提供技術(shù)保障。

　　天津檢驗(yàn)檢疫局紙張紙漿檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室是第一批國家級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。近幾年來，實(shí)驗(yàn)室先后引進(jìn)了熒光PCR等高端檢測設(shè)備，技術(shù)實(shí)力大幅提高。針對國外一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品大量進(jìn)口國內(nèi)的現(xiàn)狀，實(shí)驗(yàn)室科研人員先后走訪上海、廣東、山東等口岸，在深入調(diào)研、了解需求的基礎(chǔ)上，于2011年向國家質(zhì)檢總局提出“一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全衛(wèi)生項(xiàng)目快速檢測技術(shù)的研究”課題，并于2012年經(jīng)批準(zhǔn)立項(xiàng)。

　　科研創(chuàng)新破解難題

　　易感染致病菌是影響一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品安全的主要因素之一。根據(jù)現(xiàn)行國家衛(wèi)生用品安全監(jiān)管體系，沙門氏菌(Salmonella spp)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)，金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，大腸桿菌(E.coli)和白色念珠菌(Candida albicans)均屬重點(diǎn)關(guān)注的衛(wèi)生用品致病菌。用傳統(tǒng)方法檢測這類致病菌，程序較繁瑣，準(zhǔn)確度不高，在檢測速度、敏感性與特異性等方面也有局限性。

　　用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法代替動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和菌類培養(yǎng)，是目前國內(nèi)外檢測科研技術(shù)的研究方向。天津檢驗(yàn)檢疫局工業(yè)產(chǎn)品安全技術(shù)中心實(shí)驗(yàn)室人員開展以分子生物學(xué)方法為基礎(chǔ)的一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品毒理學(xué)和微生物快速檢測技術(shù)研究，經(jīng)過反復(fù)比較，課題組最終確定選用多重PCR技術(shù)，在同一反應(yīng)體系中同時(shí)加入多對引物擴(kuò)增多條目的DNA片段，實(shí)現(xiàn)多種病原微生物的同時(shí)檢測，為病原微生物的鑒定提供了快速、靈敏、經(jīng)濟(jì)的方法。

　　課題組參照文獻(xiàn)中沙門氏菌的invA基因、綠膿桿菌的ETA基因、金黃色葡萄球菌的nuc基因，大腸桿菌的phoA基因和白色念珠菌5SrRNA區(qū)特異的非轉(zhuǎn)錄區(qū)為靶基因，選取這5個(gè)基因序列所設(shè)計(jì)的引物，對上述菌株進(jìn)行PCR檢測。對選取的目的菌株進(jìn)行單重及多重PCR擴(kuò)增，結(jié)果目的菌株均能顯示出特異條帶，說明本反應(yīng)體系穩(wěn)定，引物特異性良好。

　　課題組采用單管多重PCR體系，通過二重PCR隨機(jī)組合、三重PCR隨機(jī)組合方法對實(shí)驗(yàn)菌株進(jìn)行檢測，均得到了較為滿意的檢測靈敏度。

　　科技成果實(shí)用有效

　　課題建立的多重PCR方法可完成對多種病原微生物的檢測，有較好的特異性和敏感性，并實(shí)現(xiàn)了高通量檢測，為衛(wèi)生用品中致病菌的快速篩查提供了一種重要技術(shù)手段。比傳統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)方法簡便經(jīng)濟(jì)，采用該方法目前可以在兩天之內(nèi)完成樣品的檢測，大大提高了檢測速度。該方法目前已在天津市紙質(zhì)用品生產(chǎn)企業(yè)得到應(yīng)用，并擬在全國各大口岸進(jìn)行推廣。

　　項(xiàng)目還設(shè)計(jì)了一套一次性使用紙質(zhì)衛(wèi)生品的前處理裝置。該裝置針對目前紙質(zhì)衛(wèi)生品處理過程通過人工完成，存在自動(dòng)化程度低、樣品反應(yīng)效率低、人工取樣精度低等問題，研發(fā)了一套全自動(dòng)的紙質(zhì)衛(wèi)生品前處理裝置，該裝置可以將整塊紙質(zhì)衛(wèi)生品裁切成塊狀的結(jié)構(gòu)，便于做進(jìn)一步檢測，提高了紙質(zhì)衛(wèi)生品與試劑之間的反應(yīng)效率，滿足大規(guī)模的處理需求。同時(shí)采用了電子稱重計(jì)和試劑計(jì)量模塊，具有計(jì)量精度高、處理結(jié)果可靠度高的優(yōu)點(diǎn)。目前，該裝置已獲得國家知識產(chǎn)權(quán)局兩項(xiàng)實(shí)用新型專利授權(quán)。